Typiske komponenter i enfluorescensmikroskoper:
Fluorescerende fargestoffer (fluoroforer)
En fluorofor er en fluorescerende forbindelse som sender ut lys igjen når den eksiteres av lys.
Fluoroforer inneholder vanligvis flere bundne aromatiske grupper, eller er plane eller sykliske molekyler med flere π-bindinger.
Mange fluorescerende fargestoffer er designet for mange biomolekyler.
Noen av disse er små molekyler som er iboende fluorescerende og binder biomolekylet av interesse. Gode eksempler på disse er nukleinsyreflekker som DAPI og Hoechst, phalloidin, som brukes til å farge aktinfibre i pattedyrceller.
lyskilde
Fire hovedtyper lyskilder brukes, inkludert xenonbuelamper eller kvikksølvlamper med eksitasjonsfiltre, lasere og høyeffekts LED.
Lasere brukes hovedsakelig i sofistikerte fluorescensmikroskopiteknikker, mens xenonlamper, kvikksølvlamper og lysdioder med dikroiske eksitasjonsfiltre ofte brukes i bredfeltsfluorescensmikroskopi.
Eksitasjonsfilter
Eksitereren er typisk et båndpassfilter som bare passerer bølgelengder absorbert av fluoroforen, og derved minimerer eksitasjon fra andre fluorescerende kilder og blokkerer eksitasjonslys i fluorescensemisjonsbåndet.
dikroisk speil
Et dikroisk filter eller tynnfilmfilter er et veldig presist fargefilter som brukes til å selektivt reflektere lys i et lite utvalg av farger mens det reflekterer andre farger.
Utslippsfilter.
Emitteren er vanligvis et båndpassfilter som bare passerer bølgelengden som sendes ut av fluoroforen og blokkerer alt uønsket lys utenfor dette båndet, spesielt eksitasjonslyset.
Filtre sikrer minimal bakgrunn ved å filtrere ut uønsket eksitasjonsenergi (inkludert UV og IR) eller prøve- og systemautofluorescens.
